Questions souvent posées (QSP) à propos de l’ELISPOT

Qualité de l’image
 


Peut - on utiliser les analyseurs Immunospot® pour des analyses à deux couleurs?

Oui, l’équipement informatique et le logiciel des analyseurs sont adaptés pour des analyses à une et deux couleurs.

 

Comment CTL garantit-il l’excellence de la qualité de l’image?
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Services de lecture/ScAnalyse
Analyseurs d’ELISPOT
Plaques d’ELISPOT
Respect des normes GLP (good laboratory practice)

Quelle est la résolution des analyseurs Immunospot®?

La résolution obtenue avec les analyseurs de S5 est de 1600 x 1200 pixels et celle obtenue avec ceux de S5 UV est de 1200 x 1024 pixels.


Comment l’éclairage est-il assuré dans les analyseurs Immunospot®?

Les analyseurs Immunospot® utilisent une configuration brevetée afin d’éclairer la surface totale formant le fond d’un puits. Les meilleurs résultats seront obtenus avec des plaques présentant une surface non réfléchissante (opaque) et de couleur neutre (blanche). De plus, les modèles S5 et S5 UV comportent un système automatique d’ajustement de la lumière optionnel qui permet le dosage précis de la lumière pour chaque puits lorsque le bruit de fond varie drastiquement.


Quels types d’expériences peuvent nécessiter une haute résolution?

Avec toutes les catégories de spots, des images de haute résolution apportent des informations supplémentaires quand à la morphologie des spots, ceci augmentant la précision du système avancé de reconnaissance de spots offert par le logiciel Immunospot® (SmartSpot™). La taille des spots reflète la vitesse de sécrétion et la quantité de cytokine produite par cellule. L’intensité de la stimulation des cellules T détermine aussi la taille des spots; une reconnaissance des antigènes de basse avidité résulte dans une faible productivité et des spots petits et pales. Les techniques appliquées aux TNF et Granzyme B ainsi qu’à l’IL-10 produisent souvent de petits spots. Dans tous les cas, utiliser une haute résolution d’image peut être un avantage significatif.


Quelle est la taille des documents créés au cours de la lecture?

Par défaut, les analyseurs Immunospot® gardent des images dont la perte est impossible. Les documents TIFF (tagged inline file format) sont utilisés au lieu des documents JPEG, car la compression inhérente à l’algorithme de compression JPEG introduit des distorsions des images et une perte d’information. A une résolution de 512 x 512, les images de chaque puits correspondent à des documents de 660 Kb : un seul CD peut contenir les documents générés par dix plaques et un DVD peut contenir 70 plaques. A une résolution de 1024 x 1024, les CD peuvent contenir les images de quatre plaques et les DVD celles obtenues avec 30 plaques.


Les images incluent-elles la totalité des puits ou bien les bords sont-ils éliminés?

L’image des puits comporte la totalité du fond du puits, ceci grâce au système d’auto-centrage des analyseurs Immunospot®. Chaque puits est centré de manière automatique à l’aide d’un logiciel intelligent d’algorithme. Ainsi, les analyseurs Immunospot® compensent pour les variations de fabrication des plaques de microtitration.