ÿþ<html> <head> <title>Wissenschaft: ELISPOT Assay Information</title> <link type="text/css" rel="stylesheet" href="../style.css"> <meta name="description" content="Warum Elispot?"> <meta name="keywords" content="cytokine, Elispot, Immunospot, immunology, analyzer, analysis"> </head> <body> <h1> <a class="headlink" href="wissenschaft-elispot-assays.html"> <img src="../images/arrow_bwd.gif" width="12" height="12" border="0" alt="" align="middle"> Warum Elispot?<br> </a> </h1> <table cellpadding="0" cellspacing="0" border="0" width="610"> <tbody> <tr> <td width="288"> <img src="../images/science-elispot.jpg" width="288" height="402" border="0" alt=""> <u>Abbildung 1 </u> </td> <td width="25"><br> </td> <td valign="top"> <p valign="top"> Abbildung 1: Die einzigartige Sensitivität des ELISPOT Assays, die es ermöglicht kleinste Anzahlen Zytokin-produzierender T Zellen zu erkennen und sichtbar zu machen. Die angegebene Anzahl IFN-³ produzierender T Zellen wurde mit 1 x 106 Antigen-präsentierender Zellen ( APC ) gemischt. Die Anzahl IFN-³ produzierender Zellen wurde untersucht mit ELISPOT-Assay (oben) , intrazytoplasmatischer Zellfärbung (Mitte) und ELISA (unten). </p> </td> </tr> </tbody> </table> <br> <br> <table cellpadding="0" cellspacing="0" border="0" width="610"> <tbody> <tr> <td class="textleft" valign="top" width=""> <p> Die Vorteile des Zytokin-ELISPOT-Assays sind: </p> <ul> <li> Präzise <i>ex vivo</i> Frequenzmessungen bis hin zur Abgrenzung von einer Zelle in einer Million. Diese Auflösung ist um Größenordnungen höher als die, die mit intrazytoplasmatischer Zytokin- oder Tetramer-Färbung oder mit ELISA erreicht werden kann ( siehe Abbildung 1). Diese erhöhte Sensitivität ist entscheidend, da antigenspezifische T Zellen <i>in vivo</i> typischer Weise in kleiner Anzahl vorliegen. </li> <li> Großserielle T Zell-Analyse wird möglich. Ein eingearbeitetes Labor-Team kann Hunderte von Proben hinsichtlich ihrer Reaktivität gegenüber etlichen Antigenen untersuchen. </li> <li> Verglichen mit andern Assays werden weitaus weniger Zellen benötigt. Zum Beispiel reichen 45ml Blut aus um die Reaktivität gegenüber 600 verschiedenen Antigenen/ Peptiden zu prüfen. </li> <li> Es können Ziel-Determinanten von CD4 oder CD8 Zellen definiert werden. ELISPOT Assays sind ideal für das Epitop-Mapping von Peptide-Libraries, da lediglich wenige Zellen benötigt werden und der ELISPOT-Assay im großseriellen Verfahren durchgeführt werden kann. </li> <li> Die funktionelle Avidität der antigenspezifischen T Zellen kann ermittelt werden. Dies wird durch die halbmaximale Peptid-Dosis bestimmt.</li> <li> Der tatsächliche Sekretionsprozess pharmakologisch unbehandelter Zellen kann untersucht werden. Wird eine reduzierte Netto-Produktion nachgewiesen, kann diese Minderung auf einer geringern Anzahl sekretorischer Zellen oder auf einer geringeren Produktivität der einzelnen Zelle beruhen. </li> <li>Lymphozyten überleben die ELISPOT-Assays. Dies ermöglicht anschließende Verwertung für weitere Untersuchung oder Kryokonservierung. </li> <li> Kryokonservierte humane Lymphozyten können ohne Funktionsverlust untersucht werden. Unbehandelte und behandelte Proben können nebeneinander untersucht werden, mit reproduzierbaren Ergebnissen. </li> </ul> </td> </tr> </tbody> </table> <SCRIPT language="JavaScript"> if (top.frames.length == 0) { self.location.href = "index.html?wissenschaft-elispot-assay-info.html"; } </SCRIPT> <NOSCRIPT> <BR> Zurück zur CTL-Homepage und weiteren Informationen zu <A HREF="../index.html" target="_top"> ELISPOT</a>. </NOSCRIPT> <!-- Piwik --> <script type="text/javascript"> var pkBaseURL = (("https:" == document.location.protocol) ? "https://www.immunospot.com/piwik/" : "http://www.immunospot.com/piwik/"); document.write(unescape("%3Cscript src='" + pkBaseURL + "piwik.js' type='text/javascript'%3E%3C/script%3E")); </script><script type="text/javascript"> try { var piwikTracker = Piwik.getTracker(pkBaseURL + "piwik.php", 2); piwikTracker.trackPageView(); piwikTracker.enableLinkTracking(); } catch( err ) {} </script><noscript><p><img src="http://www.immunospot.com/piwik/piwik.php?idsite=2" style="border:0" alt="" /></p></noscript> <!-- End Piwik Tracking Code --> </body> </html>