Häufig gestellte Fragen zum ELISPOT

Durchführung des Assays

	Welche Pipettenspitzen kann ich für den ELISPOT-Assay verwenden? Um Zellen zu pipettieren, sind Pipettenspitzen mit einer weiten Öffnung besser geeignet, damit die Scherkräfte, die zur Apoptose von T-Zellen führen, geringer sind. (Vermeiden Sie, die Membran mit den Pipettenspitzen zu berühren.)		Andere Fragen-Kapitel: Scannen und Analyse ELISPOT-Analyzer ELISPOT-Platten Bildqualität GLP-Konformität
	Manchmal erhalte ich Streifen und unregelmäßige Punkte auf dem Boden der Wells. Was könnten die Ursachen dafür sein? T-Zellen können sich im Verlauf des Assays aktiv bewegen. Insbesondere T-Zellen, die in vivo oder in vitro präaktiviert worden sind, bewegen sich schnell und hinterlassen dabei eine Spur von Zytokinen. Auch wenn die Platten während der Bindungsphase erschüttert (zum Beispiel durch Zuschlagen der Inkubator-Tür) oder herumtransportiert werden, bewegen sich die Zellen und hinterlassen Streifen und unregelmäßig geformte Punkte.
	Kann ich Platten im Inkubator übereinander stapeln? Um eine gleichmäßige Temperaturverteilung zu gewährleisten, ist das Stapeln von Platten nicht zu empfehlen.
	Wie können die Platten nach dem Entwickeln am besten getrocknet werden? Die beste Möglichkeit ist es, die Platten über Nacht aufrecht in eine Flow-Hood zu stellen. Stellen Sie sicher, dass die Platten nicht bei Temperaturen über 37°C getrocknet werden, da andernfalls die Membranen brechen könnten.
	Wie lange kann ich getrocknete Platten aufbewahren? Wenn sie lichtgeschützt gelagert werden, sind Platten für rote Assays bis zu fünf Monaten stabil. Platten für blaue Assays sind stabiler, aber es ist trotzdem ratsam, auch sie lichtgeschützt aufzubewahren.
	Kann ich T-Zellen einfrieren und trotzdem noch für ELISPOT verwenden? Wenn die Protokolle von CTL befolgt und unsere Einfriermedien verwendet werden, können humane PBMCs ohne Funktionsverlust eingefroren werden. Bitte kontaktieren Sie ctl-e@immunospot.com für weitere Informationen.
	Stellt CTL Protokolle für den Assay zur Verfügung? Ja, CTL stellt Protokolle für Ein- und Zwei-Farben-Assays zur Verfügung. CTL bietet auch praktisches Labor-Training und Beratung für den Assay an. Bitte erfragen Sie Details unter ctl-e@immunospot.com.